حمض البروتياز
  • Air Proحمض البروتياز

حمض البروتياز

يستخدم هذا البروتياز الحمضي لتحديد نشاط التحلل ، معبراً عنه بوحدات الهيموغلوبين على أساس التيروزين (HUT).

أرسل سؤال    PDF تحميل

ثمرة ضرب


التطبيق والمبدأ

يستخدم بروتياز الحمض هذا لتحديد نشاط التحلل البروتيني ، معبراً عنه كوحدات هيموغلوبين على أساس التيروزين (HUT) ، للمستحضرات المشتقة من Aspergillus oryzae var و Aspergillus niger var ، ويمكن استخدامه لتحديد نشاط البروتياز الأخرى عند درجة الحموضة 4.7 . يعتمد الاختبار على التحلل المائي الأنزيمي لمدة 30 دقيقة لركيزة الهيموغلوبين عند درجة الحموضة 4.7 و 40 درجة. يتم ترسيب الركيزة غير المتحللة بحمض ثلاثي كلورو أسيتيك وإزالتها عن طريق الترشيح. يتم تحديد كمية الهيموجلوبين المذاب في المرشح بالطيف الضوئي.


الكواشف ومحاليل حمض البروتياز
الهيموغلوبين استخدم مسحوق ركيزة الهيموجلوبين (شركة سيجما الكيميائية ، رقم الكتالوج H2625) أو مادة مماثلة عالية الجودة قابلة للذوبان تمامًا في الماء.
محلول عازلة خلات: قم بإذابة 136 جرام من أسيتات الصوديوم (NaC2H3O2 · 3H2O) في ماء كافٍ لصنع 500 مل. اخلط 25.0 مل من هذا المحلول مع 50.0 مل من حمض الخليك 1 مول ، ثم خفف إلى 1000 مل بالماء ، واخلطه. يجب أن يكون الرقم الهيدروجيني لهذا المحلول 4.7 ± 0.02.
محلول الركيزة قم بنقل 4.0 جرام من الهيموجلوبين إلى دورق سعة 250 مل ، أضف 100 مل من الماء ، وحركه لمدة 10 دقائق ليذوب. اغمر أقطاب مقياس الأس الهيدروجيني في المحلول ، وأثناء التحريك المستمر ، اضبط الرقم الهيدروجيني إلى 1.7 بإضافة حمض الهيدروكلوريك 0.3 ن. بعد 10 دقائق ، اضبط الأس الهيدروجيني إلى 4.7 بإضافة 0.5 م أسيتات الصوديوم. ينقل المحلول إلى دورق حجمي سعة 200 مل ويخفف إلى الحجم بالماء ويخلط. هذا المحلول مستقر لمدة 5 أيام عند تبريده.
محلول حمض ثلاثي كلورو أسيتيك: قم بإذابة 140 جم من حمض ثلاثي كلورو أسيتيك في حوالي 750 مل من الماء. انقل المحلول إلى دورق حجمي سعة 1000 مل وخفف إلى الحجم بالماء واخلطه جيدًا.

تحضير العينة قم بإذابة كمية من العينة في محلول خلات المخزن المؤقت لإنتاج محلول يحتوي ، في كل مل ، بين 9 و 22 HUT. (سينتج عن هذا التركيز قراءة امتصاص ، في الإجراء أدناه ، ضمن النطاق المفضل من 0.2 إلى 0.5.)


إجراء حمض البروتياز
Pipet 10.0 مل من محلول الركيزة في كل سلسلة من أنابيب الاختبار 25- × 150 مم: واحد لكل اختبار إنزيم والآخر للركيزة الفارغة. تسخين الأنابيب في حمام مائي عند 40 درجة لمدة 5 دقائق. لكل أنبوب ، باستثناء الركيزة الفارغة ، أضف 2.0 مل من تحضير العينة ، وابدأ توقيت رد الفعل في لحظة إضافة المحلول ؛ إضافة 2.0 مل من محلول خلات العازلة إلى الأنبوب الفارغ الركيزة. أغلق الأنابيب بالسدادات المطاطية رقم 4 ، واضغط على كل أنبوب برفق لمدة 30 ثانية على راحة اليد للمزج. قم بتسخين كل أنبوب في حمام مائي عند 40 درجة لمدة 30 دقيقة بالضبط ، ثم ضع 10.0 مل من محلول حمض التريكلورواسيتيك في كل أنبوب بسرعة. قم بهز كل أنبوب بقوة ضد السدادة لمدة 40 ثانية ، ثم اتركه ليبرد إلى درجة حرارة الغرفة لمدة ساعة واحدة ، وقم بهز كل أنبوب على السدادة على فترات من 10 إلى 12 دقيقة خلال هذه الفترة. قم بإعداد فراغات الإنزيم على النحو التالي: تسخين ، في أنابيب منفصلة ، 10.0 مل من محلول الركيزة وحوالي 5 مل من تحضير العينة في حمام مائي لمدة 30 دقيقة ، ثم أضف 10.0 مل من محلول حمض ثلاثي كلورو أسيتيك إلى محلول الركيزة ، ورج جيدًا لمدة 40 ثانية ، وإضافة إلى هذا الخليط 2.0 مل من تحضير العينة المسخن مسبقًا. رج مرة أخرى ، وبرد في درجة حرارة الغرفة لمدة 1 ساعة ، ورج على فترات 10-12 دقيقة
في نهاية ساعة واحدة ، قم بهز كل أنبوب بقوة ، وقم بالتصفية من خلال ورق الترشيح Whatman رقم 42 مقاس 11 سم ، أو ما يعادله ، مع إعادة تصفية النصف الأول من المرشح من خلال نفس الورقة. تحديد امتصاص كل مرشح في خلية بحجم 1 سم ، عند 275 نانومتر ، مع مقياس طيف ضوئي مناسب ، باستخدام المرشح من الركيزة الفارغة لضبط الجهاز على الصفر. قم بتصحيح كل قراءة بطرح القراءة الفارغة المناسبة للإنزيم ، وتسجيل القيمة التي تم الحصول عليها على أنها AU.
[ملاحظة: إذا لم يتم الحصول على قراءة امتصاص مصححة بين 0.2 و 0.5 ، كرر الاختبار باستخدام أكثر أو أقل من تحضير الإنزيم حسب الضرورة.]

منحنى قياسي نقل 100.0 مجم من L-tyrosine ، من الدرجة الكروماتوجرافية ، أو ما يعادلها (Aldrich Chemical Co.) ، تم تجفيفها مسبقًا إلى وزن ثابت ، إلى دورق حجمي سعة 1000 مل. تذوب في 60 مل من حمض الهيدروكلوريك 0.1 ن. عندما يذوب L-tyrosene تمامًا ، قم بتخفيف المحلول إلى الحجم بالماء ، واخلطه جيدًا. يحتوي هذا المحلول على 100 ميكروغرام من التيروزين في 1.0 مل. قم بإعداد ثلاث تخفيفات أخرى من محلول المخزون هذا لاحتواء 75.0 و 50.0 و 25.0 ميكروغرام من التيروزين لكل مل. تحديد امتصاص المحاليل الأربعة عند 275 نانومتر في خلية 1 سم على مقياس طيف ضوئي مناسب مقابل 0.006 ن حمض الهيدروكلوريك. قم بإعداد مخطط للامتصاصية مقابل تركيز التيروزين. أوجد ميل المنحنى بدلالة الامتصاصية لكل ميكروغرام من التيروزين. اضرب هذه القيمة في 1.10 ، وسجلها كـ AS. يجب الحصول على قيمة تقارب 0.0084.


حساب حمض البروتياز
وحدة HUT واحدة من محلل البروتين (البروتياز الحمضي) يُعرَّف النشاط على أنه مقدار الإنزيم الذي ينتج ، في دقيقة واحدة في ظل الظروف المحددة ، تحلل مائي يكون امتصاصه عند 275 نانومتر هو نفسه الموجود في محلول يحتوي على 1.10 ميكروغرام / مل من التيروزين في 0.006 نيتروجين حمض الهيدروكلوريك.
حساب HUT لكل غرام من تحضير الإنزيم الأصلي بالمعادلة

HUT / g = (AU / AS) × (22/30 واط)

حيث 22 هو الحجم النهائي لمحلول الاختبار ؛ 30 هو وقت رد الفعل ، في دقيقة ؛ و W وزن العينة الأصلية المأخوذة بالجرام.

[ملاحظة: قيمة AS ، في ظل ظروف مضبوطة وموحدة بعناية ، هي 0.0084 ؛ يمكن استخدام هذه القيمة للأعمال الروتينية بدلاً من القيمة التي تم الحصول عليها من المنحنى القياسي ، ولكن يجب استخدام القيمة الدقيقة المحسوبة من المنحنى القياسي للحصول على نتائج أكثر دقة وفي حالات الشك.]


شهادة تحليل


اسم المنتج حمض البروتياز    
اسم آخر غير متاح بلد المنشأ الصين
التواء Aspergillus oryzae تاريخ الصنع 13 مايو 2019
رقم الدفعة SP19050903 تاريخ الإنتهاء 12 مايو 2021
صفقة 25 كجم / دلو كمية 100 كجم
بروتوكول مواصفات النتائج طريقة
التحليل الفيزيائي والكيماوي
وصف مسحوق بني يتوافق المرئية
الرائحة والذوق الرائحة والطعم المميزان يتوافق المذاق
رطوبة NMT 7٪ 5.1٪ محلل الرطوبة
هوية
نشاط محدد إيجابي لنشاط بروميلين يتوافق في بيت
نشاط
نشاط البروتياز NLT 500000 كوخ / ز 508،270 كوخ / جم لجنة الاتصالات الفدرالية السابع
الميكروبيولوجيا
إجمالي عدد البكتيريا
البكتيريا القولونية (CFU / g)
القوالب والخمائر
بكتريا قولونية
السالمونيلا
المكورات العنقودية الذهبية
Pseudomonas aeruginosa
NMT 3،000 CFU / g
NMT 30 CFU / ز
NMT 100 CFU / ز
غائب
غائب
غائب
غائب
500 CFU / ز
<10 كفو / ز
<10 كفو / ز
لم يتم الكشف عن
لم يتم الكشف عن
لم يتم الكشف عن
لم يتم الكشف عن
FDA BAM Online Ch.3
FDA BAM Online Ch.4
FDA BAM Online Ch. 2
FDA BAM Online Ch.4
FDA BAM Online Ch.5
FDA BAM Online الفصل 12
AOAC
معادن ثقيلة
قيادة
الزئبق
الكادميوم
الزرنيخ
NMT 3 جزء في المليون
NMT 0.1 جزء في المليون
NMT 1 جزء في المليون
NMT 1 جزء في المليون
0.21 جزء في المليون
< 0.1 جزء في المليون
<1 جزء في المليون
<1 جزء في المليون
USP <231>
USP <231>
USP <231>
USP <231>
التخزين: يُحفظ في مكان بارد وجاف محمي من الضوء ، ويُحفظ الحلة مغلقة عند عدم الاستخدام.
الخلاصة: يتوافق مع معايير IU.
مدة الصلاحية: العمر الافتراضي لحمض البروتياز في ظل ظروف التخزين المحددة والتعبئة محكمة الغلق ستكون عامين.
المنتج يتوافق مع المواصفات المذكورة أعلاه
معتمدة من قبل RICKY H. ZHU المفوض بالتوقيع
*The above information is a direct translation of the information provided to Newgen Biotech from the manufacturer of البروتياز الحمضي. This Certificate of Analysis should be used for informational purposes and is not intended as a substitute for strict quality control analysis by the purchaser of this product.

التعبئة والتغليف والتخزين

كيس تغليف المواد الغذائية الصلبة ، 25 كجم / برميل.


يجب تخزين حمض البروتياز في أماكن جافة وباردة وجيدة التهوية بعيدًا عن الشمس والحرارة.

دفع :T / T ، Paypal ، Western Union ، Alibaba Trade Assurance ، VISA ، MasterCard ، الفحص الإلكتروني ، الدفع لاحقًا ، LC وما إلى ذلك.

العلامات الساخنة: حمض البروتياز ، المصنعين ، الموردين ، البيع بالجملة ، الشراء ، المصنع ، حسب الطلب ، في المخزون ، السائبة ، عينة مجانية ، العلامات التجارية ، الصين ، صنع في الصين ، رخيصة ، الخصم ، السعر المنخفض ، شراء الخصم ، السعر ، قائمة الأسعار ، الاقتباس ، GMP ، الجودة ، أحدث عمليات البيع ، مدة الصلاحية لمدة عامين

روى فئة

أرسل سؤال

الرجاء لا تتردد في تقديم استفسارك في النموذج أدناه. وسوف نقوم بالرد عليك في 24 ساعة.